1×TBST粉末型

1×Tris-buffered Saline Tween（Power）

簡介：

TBST為白色至類白色速溶顆粒，每袋TBS-T速溶顆?？膳渲?L 1× TBS-T緩沖液，操作簡便，使用方便。TBS-T的主要成分是氯化鈉、氯化鉀、Tris緩沖鹽和Tween-20，1× TBST緩沖液中含有的氯化鈉濃度為137 mM、氯化鉀的濃度為2.7 mM，Tris緩沖鹽的濃度為25 mM，Tween-20的含量為0.05%。

  TBST是一種在生物學(xué)上應(yīng)用廣泛的緩沖液，主要用于免疫組化、原位雜交、酶聯(lián)免疫、免疫印跡實驗中，常用作洗滌緩沖液，也常用于抗體的稀釋以及封閉液的配制。

使用方法

1. 量取約600 ml的蒸餾水加入燒杯，并放置一個磁性攪拌子于燒杯中。

2. 將燒杯置于磁力攪拌器上，慢慢加入1袋TBS-T速溶顆粒的全部內(nèi)容物，攪拌溶液直至完全溶解。

3. 向步驟2的TBST溶液中加入蒸餾水，定容至1 L，即為1×。

保存條件：

常溫保存。

Western blot的洗液TBST是實驗室常用的配制液體，對于TBST的配方也基本上相差不多，其中配方中就有一種組分是Tween-20，一種黃色或琥珀色澄明的油狀液體，具有特殊的臭氣和微弱苦味。用移液槍吸取時會有一種滯后感。為什么在Western blot的洗液TBST中要加入這么一種試劑，Tween-20在Western blot 中在發(fā)揮什么樣的作用呢？

1、Tween-20

首先了解一下什么是Tween-20。Tween-20也寫作Tween 20，也稱Polyethylene glycol sorbitan monolaurate，中文名為吐溫-20或吐溫20。Tween-20為黃色或琥珀色澄明的油狀液體，具有特殊的臭氣和微弱苦味。分子中含有較多的親水性基團，可與水、甲醇、乙醇、異丙醇、丙二醇、乙二醇、棉子油等混溶。是常用的非離子性去垢劑。

2、Tween-20的應(yīng)用

Tween-20是一種非離子型表面活性劑。用途為水包油乳化劑、可用作溶劑、擴散劑、穩(wěn)定劑、潤滑劑和抗靜電劑等。氣相色譜固定液(最高使用溫度120℃)分離分析揮發(fā)油、脂肪酸酯、醇、酮和鹵化物。

3、Tween-20作用

Western blot的操作流程中大部分都用到TBST洗液，而且還是封閉，一抗二抗孵育這種比較關(guān)鍵的步驟。通常Tween-20作為一種非離子型表面活性劑，效果和SDS、BSA作用差不多，主要是封閉膜上蛋白的非結(jié)合位點，以降低背景，增強抗體的特異性結(jié)合。理想的封閉劑應(yīng)該封閉所有未結(jié)合位點而不替換膜上的靶蛋白、不結(jié)合靶蛋白的表位、也不與抗體或檢測試劑有交叉反應(yīng)。如果脫脂牛奶封閉效果不好可以提高吐溫濃度。

在WB洗液里的吐溫是和BSA一樣，對抗原抗體蛋白提供保護作用，同時因為是表面活性劑（司盤加成親水的環(huán)氧乙烷基團后的化合物），可以減少抗體對抗原的非特異性作用，用于洗脫未結(jié)合的抗體、減少非特異性結(jié)合。Tween-20是我們用TBST的時候Tween-20得用量是0.5ml/L，不加SDS。

引用TBST發(fā)表文章

1. [2022 IF=6.9] Galactinol synthase 2 infuences the metabolism of chlorophyll, carotenoids, and ethylene in tomato fruits.

Author: Huidong Zhang, Kunpeng Zhang, Xueya Zhao, Mengxi Bi, Yudong Liu, Shuo Wang, Yi He，Kui Ma, Mingfang Qi

Product：TB5070P 1×TBST 粉末型

Journal: Journal of Experimental Botany Published: 15 March 2024

Institution：College of Horticulture, Shenyang Agricultural University

Paper link： https://doi.org/10.1093/jxb/erae121