臺盼藍(lán)染色液（Trypan Blue Staining Solution）

●     產(chǎn)品組成：

● 產(chǎn)品簡介：

臺盼藍(lán)（Trypan Blue)或稱臺盼蘭、錐蟲藍(lán)，是細(xì)胞活性染料，常用于檢測細(xì)胞膜的完整性與細(xì)胞的存活率，是組織和細(xì)胞培養(yǎng)中最常用的死細(xì)胞鑒定染色方法之一。正常的活細(xì)胞細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)完整，能夠排斥臺盼藍(lán)，細(xì)胞不會被染成藍(lán)色；而喪失活性或細(xì)胞膜不完整的細(xì)胞可被臺盼藍(lán)染成藍(lán)色。臺盼藍(lán)可被巨噬細(xì)胞吞噬，故可用于巨噬細(xì)胞的活體染色劑。凋亡小體也有臺盼藍(lán)拒染現(xiàn)象，因此臺盼藍(lán)溶液不能區(qū)分凋亡細(xì)胞和死亡細(xì)胞。臺盼藍(lán)染色后，通過顯微鏡下直接計數(shù)或顯微鏡下拍照后計數(shù)，就可以對細(xì)胞存活率進(jìn)行比較精確的定量。染色時間只需 3-5 分鐘，操作簡單。

● 貯存：

4℃保存，一年有效。

● 操作步驟：

1.收集細(xì)胞：

對于貼壁細(xì)胞先用胰酶消化液消化細(xì)胞，用適量細(xì)胞重懸液（Hank’s液或生理鹽水）重懸細(xì)胞；對于懸浮細(xì)胞，1000-2000g離心1分鐘收集細(xì)胞，棄上清，用適量細(xì)胞重懸液重懸細(xì)胞。

2.臺盼藍(lán)染色：

吸取100微升重懸的細(xì)胞到1.5 ml離心管內(nèi)，加入100微升臺盼藍(lán)染色液，輕輕混勻，染色3分鐘  (染色3分鐘時間已經(jīng)足夠，但染色時間可以更長一些，但不宜超過10分鐘)。

3.計數(shù)：

  吸取少量經(jīng)過染色的細(xì)胞，用血細(xì)胞計數(shù)板計數(shù)。通常如果要比較精確地進(jìn)行定量，每個細(xì)胞樣品至少數(shù)500個細(xì)胞，數(shù)出藍(lán)色細(xì)胞和細(xì)胞總數(shù)。

細(xì)胞存活率＝(細(xì)胞總數(shù)－藍(lán)色細(xì)胞數(shù))/細(xì)胞總數(shù)×100%

● 注意事項：

1. 染色時間不能太長，否則活細(xì)胞也會逐漸積累染料而染成顏色，使檢測結(jié)果偏低。

2. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

實驗示例：

Jurkat細(xì)胞臺盼藍(lán)染色結(jié)果，深藍(lán)色細(xì)胞為死細(xì)胞