膜蛋白增溶液A
貨號(hào)
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名稱
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規(guī)格
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DM1080
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膜蛋白增溶液A
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5 ml
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● 產(chǎn)品簡(jiǎn)介
該產(chǎn)品配套動(dòng)物膜蛋白提取試劑盒(貨號(hào):RTD8111,RTD8112)和動(dòng)物線粒體提取試劑盒(貨號(hào):RTD8115,RTD8116)使用。含有終濃度1%去垢劑DDM(n-Dodecyl
β-D-maltoside,β-DM n-十二烷基-β-D-麥芽糖苷),用于膜蛋白的溶解。
● 貯存、效期和運(yùn)輸:
-20℃貯存;一年有效;濕冰運(yùn)輸。
● 使用方法:
1 膜蛋白BN非變性樣品處理:
1.1 建議使用50
μl膜蛋白重懸液(BN電泳用)(貨號(hào):PN1020)重懸膜蛋白沉淀;
1.2 BCA方法測(cè)定蛋白濃度(貨號(hào):RTP7102);
1.3
用膜蛋白重懸液(BN電泳用)調(diào)整蛋白濃度為1
μg/μl,按需分裝,每管50
μl,-80℃保存待用;
1.4 取一管50
μl樣品,溶化混勻后4℃
16000 g 5分鐘,去除上清,保留沉淀;
1.5
沉淀中加入50
μl膜蛋白增溶液A(貨號(hào):DM1080),輕柔重懸沉淀,盡量不產(chǎn)生氣泡,冰浴10分鐘;
1.6
4℃ 16000 g 15分鐘,取上清至一干凈1.5 ml離心管中即為增溶后膜蛋白溶液(小心不要吸取沉淀),此時(shí)得到的膜蛋白濃度為1
μg/μl,其中去垢劑DDM(n-Dodecyl
β-D-maltoside,β-DM n-十二烷基-β-D-麥芽糖苷)終濃度為1%;
1.7
膜蛋白溶液中加入1/10體積10×膜蛋白A型上樣緩沖液(配套膜蛋白增溶液A使用)(貨號(hào):PL130),使用BN凝膠電泳(貨號(hào):RTD6139,RTD6140),每個(gè)泳道上樣5-20
μg。